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5个步骤搞定进行液相色谱仪各部件的日常维护!

发布时间:2017/05/25 点击量:

 
液相色谱仪使用久了机器难免会出现各种各样的问题,有些问题是由于缺少日常的维护所致。下面跟着小编来看下各个部件如何进行日常维护。

1. 液相泵的日常维护
泵的密封圈是最易磨损的部件,密封圈的损坏可能引发漏液或剧烈压力波动;单向阀的正常工作至关重要,它若发生故障,将直接影响流速的稳定性。
日常维护应注意以下几点:
①使用LCMS级的溶剂和试剂;
②确保系统压力在正常范围;
③使用完缓冲液体系后用纯水冲洗干净,防止盐沉积,系统不运行时应存储在无缓冲液的溶液或有机溶剂中;
④密封圈按照各个生产厂商的建议定期更换。进样器的日常维护样品预处理对于防止进样针和进样阀堵塞至关重要。

预处理常用方法:
①超滤;
②溶剂萃取/去盐;
③固相萃取;
④灌注净化/去盐;
⑤色谱分离;
⑥甲醇或乙腈沉淀蛋白;
⑦酸水解,酶解;
⑧衍生化。

 
2. 贮液瓶的日常维护
清洁是保持流动相贮液瓶正常使用的关键,使用LCMS级的溶剂和试剂。陈旧的流动相和用久了的试剂应定期废弃,防止生长微生物和组分改变。贮液瓶内壁定期清洗,流动相滤头定期清洗或更换。
 
3. 样品的预处理
从保护仪器角度出发,防止固体小颗粒堵塞进样管道和喷雾针,防止污染MS,降低分析背景,排除对分析结果的干扰;从ESI电离得过程分析看,电荷聚集在液滴的表面,样品和杂质在液滴表面相互竞争,不挥发物(如磷酸盐等)妨碍带电液滴挥发,大量杂质妨碍带电样品离子气化,增加电荷中和的可能。
 
4. 色谱柱的维护和保存
①每次工作结束,用高比例强溶剂冲洗色谱柱,冲去留在柱上的强吸附组分;
②净化样品,样品中的微粒会进入色谱柱,在柱头上沉积下来,造成柱压升高,柱效降低;
③避免撞击色谱柱,如掉落或超声震荡;
④柱压避免急剧变化;
⑤反相柱C18应保存在纯有机相或50%有机相中,一周不用要卸下,两端用堵头密封,避免干枯。

 
5. 流动相的选择
LCMS常用的流动相为甲醇、乙腈、水和它们不同比例的混合物以及一些易挥发盐的缓冲液,如甲酸铵、乙酸铵等,还可以加入易挥发酸碱如甲酸、乙酸或氨水等调节pH值;LCMS体系要避免使用含磷或氯的缓冲液,含钠和钾的成分必须<1mmol/l。(盐分太高会抑制离子源的信号和堵塞喷雾针及污染接口)含甲酸(或乙酸)<2%,含三氟乙酸<0.5%,含三乙胺<1%,含醋酸铵<10—5 mmol/l。 

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